刚果红染色实验观察淀粉样蛋白呈红色-上海郑核
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司
刚果红染液套装 Servicebio G1056
苏木素染液 servicebio G1004
分化液 servicebio G1005-3
返蓝液 servicebio G1005-4
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、刚果红染色：切片入刚果红染液1h，自来水洗2min。
3、背景分化：氢氧化钾溶液分化，至阳性斑块明显，背景基本无色，自来水洗。
4、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。
5、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
6、显微镜镜检，图像采集分析。
三、结果判读：
淀粉样蛋白呈红色，细胞核呈浅蓝色。
四、注意事项：
1、区分甲状腺胶质、弹力纤维和胶原纤维，可能都会染成红色；
2、分化时要掌握恰当，分化不足，胶原纤维也呈红色，分化过度，淀粉样变蛋白也可脱色。
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