瑞氏吉姆萨染色观察细胞分型嗜中性粒 嗜酸性 -上海郑核
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
离心机 DRAGONLAB D3024R
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司
瑞氏吉姆萨染液套装 Servicebio G1007
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司
二、实验步骤
1、涂片制备：取细胞悬液，离心，弃上清液，加适量PBS缓冲液，混匀后取适量滴于载玻片前端，另取一块边缘光滑的载玻片做推片，将其一端置于液滴前方，向后移动至接触液滴使液滴均匀分散在推片与载片的接触处。然后呈30-40°角均匀用力向另一端平稳地推出。涂片放置自然晾干。
2、瑞士吉姆萨染色：瑞氏吉姆萨染液盖满标本30秒，再加入2-3倍体积的PBS染液1-3min，倾去染液，蒸馏水洗净，镜检，快速烤干。
3、透明封片：干净的二甲苯5min，中性树胶封片。
4、显微镜镜检，图像采集分析。
三、结果判读：
红细胞数量多，体积小，无核，呈粉色或肉粉色；嗜中性粒细胞体积略大于红细胞，细
胞核呈紫蓝色分叶状，细胞质几乎无色；嗜酸性粒细胞体积略大于嗜中性粒细胞，细胞
核呈紫色，通常为2叶，细胞质充满嗜酸性颗粒呈红色；嗜碱性粒细胞体积略小于嗜酸
性粒细胞，细胞质内有大小不等被染成紫色的嗜碱性颗粒，核1-2叶，胞质染成淡蓝色。
淋巴细胞圆形，体积与红细胞相似，核致密染成深紫色。单核细胞体积，细胞质染
成灰蓝色，核呈肾型或马蹄型染成紫蓝色。血小板呈红色小颗粒。
四、注意事项：
1、制作良好的涂片要求厚薄适宜，分布均匀，边沿整齐。
2、制作的涂片需要充分干燥以防脱片。
3、染色时间可根据染液浓度，室温高低，细胞多少来进行调节。
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